狗狗过敏源测试流程
2024-07-12 阅读：34
狗狗过敏源测试是一个重要的过程，可以帮助主人了解狗狗对何种物质过敏，从而采取相应的预防措施。以下是根据提供的搜索结果，关于狗狗过敏源测试的一般流程：
1. 准备工作
在进行过敏源测试之前，需要确保收集足够的标本。根据搜索结果，常用的标本包括血液、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清和组织标本。采集标本后应尽可能早地进行提取，并在提取后尽快进行实验。如果不能立即进行实验，应将标本置于-20℃保存，避免反复冻融。需要注意的是，不能检测含NaN3的样品，因为NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2. 实验步骤
2.1 设置标准品孔和样本孔
在酶标包被板上设置标准品孔和样本孔。标准品孔各加不同浓度的标准品50μL，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样时应使用加样器，并尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
2.2 加酶和温育
每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。温育时需要用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
2.3 洗涤
洗涤时小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
2.4 显色和终止
显色时每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。终止时每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
2.5 测定
以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
3. 注意事项
- 标准品从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
- 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
- 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
- 一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
- 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定，计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
- 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
- 底物请避光保存。
- 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
- 所有样品、洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
- 本试剂不同批号组分不得混用。
- 如与英文说明书有异，请以英文说明书为准。
以上步骤和注意事项提供了进行狗狗过敏源测试的基本框架。然而，实际操作时应遵循具体试剂盒的说明书，并在专业人员指导下进行。此外，由于过敏源测试可能存在一定的误差，因此测试结果应由专业人员解读，并结合临床症状综合判断。
